转染*是一种新型高1效的阳离子聚合物。它可以与核酸(包括质粒、siRNA、寡聚核苷酸)相互作用形成一种复合物将核酸转运到真核细胞内,适用于大部分真核细胞的细胞转染。
转染效率较高,ABclonal 选取多种常见细胞系(包括 HEK293T、HCT116、HeLa、A549、C6、HEK293F 等),分别使用 HighGene 转染*和市面常规转染*产品进行细胞转染
注意事项:
1. 质粒 DNA:请用能够去除内毒0素的方法制备高质量的质粒 DNA。
2. 稀释液:0.85%(W/V)生理盐水,用低内毒0素纯水配制,高压消毒或除0菌过滤。
3. 培养基:经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试,推荐使用含 5~10%牛血0清的
DMEM,若转染效果不理想可尝试其它培养基。
4. 以 24 孔细胞板转染实验为例,基础型转染*,推荐每孔低内毒0素质粒 DNA 用量为 2μg、转染*用量为 3~5μl,请
在正式实验前根据不同细胞和不同培养基用报告*进行优化。
5. 如果实验目的在于筛选*药性稳定细胞系,可在细胞传代后尚未贴壁时直接进行转染,从而可节省
18~24 小时的转染前细胞培养时间。
(1)可在贴壁细胞传代尚未贴壁时立即进行转染(立传立转);
(2)转染操作可在一分钟内完成。因此,QuickShuttle 特别适合用于快速大量瞬时转染表达目的蛋白,或大量制备各种病毒载体和假病毒。