RCCS-3D模拟微重力三维动态培养系统能够使细胞贴壁免受机械损伤。
RCCS-3D旋转三维细胞培养系统是一种不同于普通转瓶培养的系统。转瓶包含一个纵轴封瓶以及周围包裹的弹性塑料壁。在这种情况下,气体运输是通过瓶颈。并且,转瓶培养的目的不是三维培养,而是二维培养。培养物沿着瓶壁生长,并且,当瓶转动,培养物就会与媒介接触。因此,这两个系统之间没有相似性(参见问题1RCCS生物反应器的工作原理)。
对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨1髓样细胞可以释放蛋白酶,血1清中含有*蛋白酶成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,现在则有目的的使用血1清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血1清蛋白形成了血1清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用。血1清还含有一些微量元素和离子,他们在代谢解1毒中起重要作用,如SeO3,塞斯康三维细胞培养,硒等。
RCCS?的培养容器中充满了用作培养基的生长液以及细胞或组织材料。整个容器由电机驱动沿水平轴旋转。细胞颗粒在水平轴内建立均质的液体悬浮轨道。培养基以及细胞颗粒随容器一起旋转且不与容器壁和它物相撞。由于系统无推进器、空气升液器、气泡或搅拌器,使*性应力减到*小。RCCS中的细胞通过膜式气体交换器来吸氧和排出CO2。任何气泡都被清除,以防其旋涡对细胞的生长的影响。无*应力使生成的三维组织具有与父系相同的结构和功能。其组织的培养密度为10E10至10E11个细胞/ml;细胞的培养密度为10E8。至今所有的细胞组织都能培养。
凡是来源于胚胎、组织器1官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。1悬浮细胞的分离方法组织材料若来自血液、羊水、胸水或的悬液材料,简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。2实体组织材料的分离方法对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,黑龙江三维细胞培养,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。