培养容器应该以什么速度旋转?
这取决于细胞聚合体的直径。当容器转动时,细胞聚合体加速,直到他们到达沉积速度,而该速度取决于细胞聚合体的大小。根据斯托克斯方程,沉降速率随着细胞聚合体半径的平方而增加。因此,随着聚合体体积上的增加,它们沉降的更迅速,同时为了防止细胞聚合体与培养壁的碰撞有必要增加旋转速度。因此,一开始可能以慢速旋转培养,例如7rpm,当细胞聚合体在体积上增长并且变得可见,再增加旋转的速度。
细胞培养的目的究竟是什么?
1.1 研究开发,如新药筛选,疫1苗、*工程、细胞工程研究与开发、单*1体制备等。
1.2 基础研究,如作用机理、*功能、疾病发生机理等研究。
2 生物制药,哪有三维细胞培养,疫1苗生产:如病毒性疫1苗(肝2炎病毒疫1苗、艾1滋病疫1苗等),多肽疫1苗(肿1瘤疫1苗)等。
2.2 *工程生产:如EPO等。
2.3 *1体、*治1疗生产。
2.4 细胞工程生产:生物细胞内的一些生物活性多肽,生物活性物质等。
2.5 利用细胞法体外测定生物活性物质的活性;并预测其在体内的和替代体内法检测其成品的生物活性。
细胞增殖检测技术
目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法,通过直接测定进行分裂
的细胞数来评价细胞的增殖能力。另一种是间接的方法,三维细胞培养价格,即细胞活力(cell viability)检测方法,通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。显然,铜陵三维细胞培养,细胞活力检测法并不能终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在某一培养条件下会自发启动凋亡程序,但的干扰可*凋亡的发生;这时若采用细胞活力检测法,显然可以区分两种条件下的细胞数量,但我们并不能从干扰组细胞数大于对照组的事实说明可促进细胞增殖的结论。所以直接的证据应该采用方法一。
其中常见检测:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克X隆形成。