亲和柱原理介绍
亲和层析(IAC)可称为色谱技术,是一种利用*原特异性可逆结合特性的SPE技术,根据*原的高选择性,从复杂的待测样品中提取目标化合物。主要原理是将*、惰性微珠共价结合,然后装入小柱,肝素亲和柱厂家,将被测溶液流过亲和柱,肝素亲和柱,而非目标化合物则沿柱流下,然后用洗脱缓冲液洗脱*原(被测物),从而得到纯化的*原(被测物),收集的*原样品液可直接用于 HPLC 分析或处理后用荧光光度计检测。
亲和柱的应用
亲和层析(Immunoaffinity Chromatography,IAC)提供了一个有效的方法,肝素亲和柱哪家好,从液体材料中进行选择净化、化合物浓缩、分类,然后从相支持物中提取纯化样本。20世纪60年代末琼脂糖载体开始(Axen等,1967),IAC成为化学中有效分离手段之一。
Van等(1987)应用IAC技术净化了猪肉中的氯随后1989年又在此技术基础上测定了蛋、牛奶(Van,1989)中的氯。其现在已成为医类、兽药、食品检测中,前处理方法应用的重要手段。
亲和柱的应用
应用:牛奶中M1的测定
(参考方法GB 541337-2010 食品安全国家标准 乳和乳制品中M1 的测定)
样品前处理
称取50g牛奶到具塞离心管中,在水浴中加热到35-37℃,4000转离心15min,除去上层乳脂,全部样品待过柱净化
样品过柱净化
1. 将亲和柱(SBHL-20-0245)连接于10ml或50ml注射管下。
2. 将处理好的样品全部通过亲和柱,控制试样以2mL/min-3mL/min稳定的流速过柱。(注意:空气不能通过柱体)
3. 以稳定的流速淋洗柱子两次,弃去全部流出液,并使2mL-3mL空气通过柱体。
4. 洗脱,流速为1mL/min-2mL/min,收集全部洗脱液于玻璃试管中,供检测用。