细胞增殖检测技术
目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法,通过直接测定进行分裂
的细胞数来评价细胞的增殖能力。另一种是间接的方法,RCCS-4D,即细胞活力(cell viability)检测方法,通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。显然,细胞活力检测法并不能终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在某一培养条件下会自发启动凋亡程序,但的干扰可*凋亡的发生;这时若采用细胞活力检测法,显然可以区分两种条件下的细胞数量,但我们并不能从干扰组细胞数大于对照组的事实说明可促进细胞增殖的结论。所以直接的证据应该采用方法一。
其中常见检测:CCK8检测法 ,MTT检测法,RCCS-4HD,Brdu检测法,Edu检测法,平板克X隆形成。
传统的二维细胞培养并不是细胞生长的天然状态,因而细胞的*表达、信号转导和形态学都可能与天然有异。近,美国莱斯大学和德克萨斯大学M.D. Andersonai症中心的研究人员阐明了一种更为简单的三维培养技术,文章发表在3月14日的《Nature Nanotechnology》上。
研究小组开发出一种生物装配器(bioassembler)。这个系统使用磁力让细胞悬浮,并促使细胞生长成三维的形状。悬浮过程是基于一种生物无机的水凝1胶(hydrogel),这种水凝1胶由三部分组成:噬菌体、磁性氧化铁和金纳米颗粒。研究小组使用的噬菌体是M13来源的,RCCS-8D,展示了RGD-4C配体肽段,以靶定金纳米颗粒和磁性氧化铁。这种基于磁性环的技术与所有标准的培养技术兼容,因此可推广到大部分实验室。
单层细胞培养由于细胞在体外改变的环境下逐渐丧失了原有的性状,往往和体内情况不相符;动物实验虽在体内进行,但体内多种因素制约以及体内和外界环境相互影响而不能观察到研究者为关心的中间过程。三维细胞培养技术模拟体内的微环境,填补了单层细胞培养和动物实验的鸿沟。该技术在医学领域的广泛运用,RCCS,用人工脉管取代细胞外基质生长支架,在完全可控制的生长条件下,能分化产生结构完整的小管,在的发育生物学研究和组织工程领域作出了*1贡献。