固相萃取柱的填料
固相萃取填料通常是色谱吸附剂,大致可以分为三大类,分别是以硅胶、高聚物、无机材料为基质。
一类是以硅胶为基质,如:Waters Sep-Pak C18固相萃取小柱,硅胶*性很强,呈弱酸性,可被用于正相或反相两种分离模式:正相提取时,*性比硅胶弱,反相提取时非*性比C18 或 C8 的弱。对于类固醇有着较好的萃取效果通常用于非*性或弱*性化合物的萃取或*性杂质的去除。主要用于血样、尿样中药品及其代谢物、多肽脱盐、环境样品中的痕量有机化合物富集、饮料中的有机酸。
第二类是以高聚物为基质,HLB固相萃取柱哪家好,如:聚乙烯-二*等。高纯度、高交联度的乙烯-二乙烯基苯聚合物为固定相填装的萃取小柱具有高载样量,可耐受*端 pH 条件和不同的溶剂,对*性化合物具有优异的保留能力。可用作酸性的、中性的和碱性化合物的通用型吸附剂,通常用于反相条件下保留含有亲水基团的疏水性化合物如:酚类、硝基芳香类等。
第三类是以无机材料为主的,如:弗罗里硅藻土、氧化铝、石墨化碳等。弗罗里硅土是一种氧化镁复合的*性硅胶吸附剂,以此为基质的萃取小柱适合于从非*性基质中吸附*性化合物,如多多环芳烃、有机氯农残等;石墨化碳黑(CARB)萃取小柱, 以石墨化碳黑为填料,萃取过程非常迅速。且对化合物的吸附容量比硅胶大一倍有余,226固相萃取柱,由于石墨化碳黑表面的正六元环结构,使其对平面分子有*强的亲和力,固相萃取柱,非常适用于很多有机物的萃取和净化,HLB固相萃取柱公司,尤其适于分离或去除各类基质如水果、蔬菜中的色素、甾醇等物质;以氧化铝为基质的填料有酸、碱、中性三种类型,适用于酸性、碱性的、中性溶剂的分离萃取。
固相萃取柱回收率低的原因及解决方法
固相萃取柱回收率低:
(1)可能原因:清洗溶剂选择不当;洗脱能力太强
解决方法:使用正确的清洗溶剂;选择洗脱能更弱的溶剂
(2)可能原因:载样时流速过快
解决方法:重力自然载样或控制载样流速≤1mL/min
(3)可能原因:SPE小柱太小
解决方法:?用更大规格的SPE小柱?用选择性更强的SPE小柱?用载样量更大的SPE小柱
(4)可能原因:洗脱前SPE小柱清洗溶剂抽干不充分
解决方法:充分抽干冲洗溶剂
(5)可能原因:洗脱不充分
解决方法:增加洗脱剂的体积,增加洗脱剂的强度;用更小规格的SPE小柱
(6)可能原因:洗脱时流速过快或过慢
解决方法:控制流速1~2ml/min
固相萃取柱的使用步骤
步骤一:预处理萃取柱。
在萃取样品之前,为了湿润固相萃取柱填料,用一满管溶剂冲洗管子。反相类型硅胶和非*性吸附剂介质,通常用水溶性溶剂预处理,然后用水或缓冲溶液。湿润吸附剂表面和渗透键合烷,以允许水更有效地湿润硅胶表面。有时前预处理溶剂使用之前。这些溶剂通常是与洗脱溶剂一样,是用之消除固相萃取管上的杂质及其对分析物的干扰,也可能该杂质只溶于强洗脱溶剂。
步骤二:加入样品。
将样品装入萃取柱,此时,固相萃取小柱中的填料会吸附样品中所感兴趣的化合物或者样品中的杂质。这样,当样品流出时,所选择的化合物(包括杂质)被留在萃取柱上。
步骤三:冲洗填料。
用一种强得能洗脱杂质而又弱得能保留感兴趣的化合物的冲洗液来冲洗杂质。
步骤四:洗脱感兴趣的化合物。
用溶剂将被吸附在萃取柱上的化合物洗脱在溶液里。