与其他三维细胞培养系统相比,灌注式细胞培养,RCCS生物反应器的优点是什么?
将细胞嵌入盘或者多孔板的三维细胞外基质为近常用的三维细胞培养方法。这个方法虽然可以产生相对不错的3D组织模型,细胞培养,但是它又被有限的物质传递(这是由于培养的静态特性,也因为基质对于物质传输是一个额外的屏障)和缺乏可测量性所限制。动态的培养系统,例如搅拌瓶,或者大规模的搅拌罐提供了非常好的物质传递,但是这些系统使用的机械应力,不仅损坏细胞,而且还阻止了它们的聚集。
这是否是转瓶培养?
转瓶包含一个纵轴封瓶以及周围包裹的弹性塑料壁。在这种情况下,气体运输是通过瓶颈。并且,转瓶培养的目的不是三维培养,而是二维培养。培养物沿着瓶壁生长,并且,当瓶转动,培养物就会与媒介接触。因此,这两个系统之间没有相似性(参见问题1RCCS生物反应器的工作原理)。
当我想在微载体珠上培养细胞时,在我装载它们进去反应器之前细胞是否需要附在微珠?
微珠和细胞可以同时被装载入反应器,但又*彼此。在它们两个被装载入反应器之后在反应器里面的细胞就会自动地附着微珠。
使用微重力生物反应器时需要一个恒温箱吗?
是的,恒温箱是为了保持培养的温度,pH值,氧气供给量。应当注意水是从硅酮氧合器蒸发到恒温箱的。这个将导致培养皿中产生气泡。所以,为了保持水蒸气的浓度,细胞培养灌注式,防止在培养容器中的蒸发,3D细胞培养,恒温箱里的湿度也是很重要的。
细胞交叉污染对细胞的影响及污染物的检测
细胞培养中,细胞间交叉污染并不罕见,多是由于在培养中操作时各种细胞同时进行,混杂使用器皿和液体所致,这种污染能使细胞的生长特性、形态特征等发生变化,有些变化较轻、不易察觉,有些可能由于污染的细胞具有生长优势终压过原来细胞而导致细胞的生长*,终。常用观察细胞形态学、分析生长特性和核型、检测细胞的标记物等方法检测交叉污染的细胞。