烟台市RCMW-灌注式培养RCMW-三维细胞培养(诚信商家)

RCCS?的原理和优势

相比动态和静态组织培养系统，RCCS的主要优势是其能提供理想的环境，RCMW灌注式培养，从而允许细胞聚集、3维生长和分化。这个优势使得我们的培养环境非常接近于体内。

在大多数的动态培养系统中细胞/组织会受损，这主要是其与推进器接触而致。那么它为何会与推进器接触呢？因为悬浮，那悬浮是如何产生的？这归因于以下2个力：

1.受到推进器产生的力；

2.在培养的氧交换和悬浮过程中喷出的气泡所产生的 剪切力。

在静态的平面培养瓶/培养皿中，2维的环境和塑料基质会改变*表达和阻止分化。 相比之下，在RCCS?中生长的细胞/组织因随机变化的重力矢量而悬浮，从而在培养液中成连续的自由落体状态。一个较好的比喻是：细胞从无限高的充满液体的管中落下。组织在培养液中会落下、翻滚和混合，受不到任何主宰生长方向的单个重力矢量的影响；组织会向各个方向生长。这就是RCCS?的机制。

由于系统无推进器、空气升液器、气泡或搅拌器，使*性应力减到1小。因维持在一个理想的流体轨道中，故细胞能共同生长、互相交流和形成3维的结构。

此外，RCCS?是目前唯1的能使研究者进行共同培养，而这种培养能提供本能的分化、高细胞增殖、低的细胞率和增加细胞产物的分泌。

RCCS-3D模拟微重力三维动态细胞培养系统培养过程中会产生气泡吗？

RCCS生物反应器的主要目的将使作用在细胞上的机械应力减到X小。甚至很少的气泡的存在将增加湍流和机械应力;因此RCCS生物反应器是零顶部空间操作，并且气体传输是通过扩散完成以此来防止气泡的形成。也许随着时间的推移，由于细胞的呼吸会有小气泡产生，去除些小气泡也是有很必要的(注X射器可以被用于有效的去除气泡)。但在培养过程中，细胞共培养RCMW，如果培养周期较长，且培养环境相对比较干燥，一般湿度低于50%RH以下时，在培养容器内部可能会产生一些*细小的气泡，这是由于培养容器内部的水分经过氧合膜被蒸发的缘故！

细胞传代的一般方法？

开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和*是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH 培养液或MEM 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血X清、庆大溶液（1 万单位）、7.5％NaHC03 溶液、0.25％胰蛋白酶、PBS 洗液。

用具：小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1）、细胞吹打管（20 ml）(以上用具需经121℃至

少15 分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、—20℃冰箱

操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好*、无异常及可X疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-0.2%LH 培养液100ml 内，加入灭活小牛血X清10m1，庆大溶液0.3m1，7.5%碳酸氢钠溶液3ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS 洗液冲洗细胞表面1-2 次，灌注式培养RCMW，每次10m1，弃去洗液，向细胞瓶内加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1 细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中，烟台市RCMW，再加入10m1 细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于37±1℃孵箱培养。约2～4 天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。