生长其中的细胞或组织是以自由落体的状态悬浮,没有搅拌器、气泡等*性压力,故组织在培养液中得以自由降落、翻转并与培养液充分混合,其容器内各方向的力量达到平衡,所以细胞/ 组织不会受到单一方向的力量影响,细胞培养技术,可朝任意方向均匀生长,是市面上唯1一可使细胞自由生长分化,细胞培养方法,增加细胞增殖速率,减少细胞和有效增加细胞产物分泌的系统。
RCCS特点
1 允许在一个三维空间的球体内共培养多种细胞
2 容器(存储营养液及细胞)在旋转时仅有较小的剪切力,因此导致的湍流非常小,便于细胞增殖
3 具有高营养素传质特点,可*细胞
4 容器转速可通过转速表进行任意调整
Synthecon INC公司于 1990 年创立,创立者为 NASA 细胞研究计划中的发明人。得到 NASA 的专利和技术转移,重新设计了专利的 Rotary Cell Culture System (RCCS) ,适用于基础医学、研发和其他临床的研究上。传统静态细胞培养是在培养瓶或皿中进行的。无论是细胞或组织均生长在二维平面空间并接触玻璃或塑料表面。这样的方式会影响细胞中*的表达且无法持...
细胞传代的一般方法?
开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和*是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH 培养液或MEM 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血X清、庆大溶液(1 万单位)、7.5%NaHC03 溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS 洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20 ml)(以上用具需经121℃至
少15 分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、—20℃冰箱
操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,成都市细胞培养,具有立体感,形态好*、无异常及可X疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH 培养液100ml 内,加入灭活小牛血X清10m1,庆大溶液0.3m1,7.5%碳酸氢钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS 洗液冲洗细胞表面1-2 次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,细胞培养步骤,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1 细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1 细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4 天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。