细胞培养方法-细胞培养-RCCS-3D

生长其中的细胞或组织是以自由落体的状态悬浮，没有搅拌器、气泡等*性压力，故组织在培养液中得以自由降落、翻转并与培养液充分混合，其容器内各方向的力量达到平衡，所以细胞/ 组织不会受到单一方向的力量影响，细胞培养技术，可朝任意方向均匀生长，是市面上唯1一可使细胞自由生长分化，细胞培养方法，增加细胞增殖速率，减少细胞和有效增加细胞产物分泌的系统。

RCCS特点

1 允许在一个三维空间的球体内共培养多种细胞

2 容器(存储营养液及细胞)在旋转时仅有较小的剪切力，因此导致的湍流非常小，便于细胞增殖

3 具有高营养素传质特点，可*细胞

4 容器转速可通过转速表进行任意调整

Synthecon INC公司于 1990 年创立，创立者为 NASA 细胞研究计划中的发明人。得到 NASA 的专利和技术转移，重新设计了专利的 Rotary Cell Culture System (RCCS) ，适用于基础医学、研发和其他临床的研究上。传统静态细胞培养是在培养瓶或皿中进行的。无论是细胞或组织均生长在二维平面空间并接触玻璃或塑料表面。这样的方式会影响细胞中*的表达且无法持...

细胞传代的一般方法？

开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和*是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH 培养液或MEM 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血X清、庆大溶液（1 万单位）、7.5％NaHC03 溶液、0.25％胰蛋白酶、PBS 洗液。

用具：小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1）、细胞吹打管（20 ml）(以上用具需经121℃至

少15 分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、—20℃冰箱

操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，成都市细胞培养，具有立体感，形态好*、无异常及可X疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-0.2%LH 培养液100ml 内，加入灭活小牛血X清10m1，庆大溶液0.3m1，7.5%碳酸氢钠溶液3ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS 洗液冲洗细胞表面1-2 次，每次10m1，弃去洗液，向细胞瓶内加入0.25％胰蛋白酶溶液，细胞培养步骤，每瓶1m1，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1 细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中，再加入10m1 细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于37±1℃孵箱培养。约2～4 天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。