常见的伪三维培养方法或系统有转瓶培养、摇瓶培养、悬滴培养、支架培养等,这些方法只是适当地改善了传统的2D培养(培养皿培养),但因为重力的存在,新生的细胞自由落体,从而导致细胞平铺生长,很难得到较接近生物体的三维形态结构体。同时,这些伪三维培养虽然改进了传统的2D培养,但同时也带入了新的风险,比如转瓶或摇瓶培养,引入了相当的液体湍流和气泡,这会严重影响细胞的正常生长,甚至坏死。而悬滴培养则无法获得交大的培养物,RCCS-2SC,同时无法适用于其他如微球培养或支架培养等特殊要求。将细胞与培养液置入内、外圆柱体之间,整个装置绕纵轴旋转,根据细胞的种类、性质、数量、培养物的大小调节容器的旋转速度,使培养物长时间保持悬浮状态。
目的 模拟微重力方法培养大鼠原代肝细胞,初步分析其形态学特点及其意义。方法 改良Seglen原位胶原酶灌注法获得大鼠肝X脏单细胞悬液,2.2×10^5个/ml加微载体Cytodex-3(4g/L)接种,采用旋转细胞培养系统(RCCS)进行模拟微重力培养。第0、6、24、72、120、168小时取样,相差、体视显微镜观察活X细胞形态,第24小时标本素-伊红(HE)染色观察*学形态,电镜观察超微结构。结果 模拟微重力培养中肝细胞24h内贴附微载体并出现三维结构,RCCS,24~72h发展为*的肝细胞一微载体聚球体。在抛物线飞行火箭内添加特殊的离心机可以区分飞行扰动和实际微重力的影响,显示在微重力中受精的卵产生了囊胚的形态变化,但是这些胚胎恢复并恢复了地球的正常发育(8)。电镜下可见细胞膜的3种不同形态,其分布与功能相一致。结论 模拟微重力培养方法能使肝细胞形成分化的三维类*结构,在*工程领域存在良好的应用前景______摘自《模拟微重力培养X肝细胞的形态特点》
*工程是生物医学工程领域中一个快速发展的新方向。这门交叉学科的核心是应用生物学和工程学的原理和方法来发展具有生物活性的人工替代物,用以维持、恢复或提高**的功能。这种治X疗模式不同于目前生物工程中占主导地位的基于蛋白质及重组DNA技术的*代治X疗方式,而属于新兴的第三代基于细胞的治X疗方式[1]。但是,只有大约一百年后,人类在月球上行走,由火箭和推进装置的复杂组合X运输。并且对于工程*的活X细胞成分,还可以进行适当的遗传操作,RCCS-D,使其具有特殊的遗传性状,从而可以结合基X因治X疗的优点。经过优化设计的工程*植入体内后,还可与受体的活*有机地整合,RCCS-2H,可以达到*的治X疗目的,是其它传统治X疗方式所无法比拟的。
*工程技术的产生源于早期细胞培养的工作。然而,尽管在60年代便开始了对细胞进行三维培养的工作,但直到近年来才成功地培养出*可用于临床的*替代物,总的说来,这一过程的发展依赖于工程技术解决问题的技巧。3D培养体系为细胞提供类似体内生长环境的支架或基质,细胞通过紧密连接或缝隙连接等连接方式建立细胞间及细胞与胞外基质间的联系,形成一定的三维结构,与体内细胞生长情况更为相似。因此,"*工程"这一名词恰如其分地表达了这一学科的内涵:*工程是"应用工程学和生命科学的原理和方法来解释正常的和病理的哺乳类动物*的基本结构-功能关系,并且发展具有生物活性的人工替代物来恢复、维持或提高*的功能"[2]。