亲和层析在一对有专一的相互作用的物质中,把其中之一联结在支持物上,用于纯化相对的另一物质。常见的亲和对如:酶和,*原和,高压制备,和受体等。支持物为琼脂糖或纤维素等。
气相层析属于分配层析或吸附层析,仅适用于分析分离挥发性和低挥发性物质。固定相是在惰性支持物(如磨细的耐火砖)上覆盖一层高沸点液体,如硅油、高沸点石蜡和油脂、环氧类聚合物。外涂层约为支持物重量的20%。分析时操作温度范围,一般从室温到200℃。特殊的层析柱能达到500℃。流动相常用氦、或氮为展层气体。气相层析分离的区带十分清晰,是由于挥发性物质在两相间能很快达到平衡,所需分析时间大为缩短,一般为数分钟至10余分钟。检测记录系统绘出的各峰是测定流出气体电阻变化的结果,因而测定样品量可到微克和毫微克水平。具有快速、灵敏和微量的优点。气相层析也能用于分离制备样品,但需增加将流出气体通过冷冻将分离物回收的装置。
固定相:色谱分离过程中的一-个固定的介质。
流动相:在层析过程中推动固定相上待分离物质朝--个方向移动的液体气体或超临界流体等
色谱分离的共同点: (1) 存在流动相固定相(2) 物质的分离还必须借助流动相的移动来推动(3) 差速运动分离原理
迁移率: (比移值)指在一定条件下,在相同时间内某一组分在固定相移动的距离与流动相本身移动距离的比值。
Rf值与分配系数K密切相关: k大Rf小.
分配系数影响因素: (1)被分离物的本身性质(2)固定相流动相的性质(3)层析柱的温度
正向色谱:固定相*性大于流动相的*性