制备液相-赛尔夫科技(图)

液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相，称为经典液相色谱法，此方法柱效低、时间长(常有几个小时)。*液相色谱法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。也称现代液相色谱。

HPLC的特点和优点

HPLC有以下特点：

高压—压力可达150~300Kg/cm2。色谱柱每米为75 Kg/cm2以上。

高速—流速为0.1~10.0 ml/min。

*—可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。

高灵敏度—紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。

使用仪器不当：只要互相有10%比例就不会出现这个问题。另一原因是在用缓冲液盐溶液（不论甲1醇含量有多少）作流动相时，制备液相，实验结束后没有换甲1醇水冲洗，使得微渗的流动相干燥形成晶体造成。不过，输送泵漏液并不是非得马上修不可，冲洗干净并在以后的使用中多加小心一般都可以正常使用。检测器漏液是个很麻烦的事，一般都是吸收池的问题，更换的费用相当高。但是并不是说一定要马上更换，还可以从实际实验效果看能否凑合使用。

液相色谱仪是属于易学难用的仪器，特别讲究“正确使用”和经验。液相工作者接触多的是流动相，流动相也是造成液相色谱各种问题的主要源头。液相色谱常见的故障一是堵，二是漏。下面就这两分别展开讨论（流动相以甲1醇为例，色谱柱以C18为例） 。

为何会堵?

“堵”的表现现象就是柱压异常升高，直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端，主要原因就是流动相里有杂质，杂质的主要来源就是*。

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