目的 模拟微重力方法培养大鼠原代肝细胞,初步分析其形态学特点及其意义。方法 改良Seglen原位胶原酶灌注法获得大鼠肝X脏单细胞悬液,2.2×10^5个/ml加微载体Cytodex-3(4g/L)接种,采用旋转细胞培养系统(RCCS)进行模拟微重力培养。第0、6、24、72、120、168小时取样,相差、体视显微镜观察活X细胞形态,第24小时标本*素-伊红(HE)染色观察*学形态,电镜观察超微结构。自由落体技术已经实施了Petaka*缺氧minichamber,以产生微重力像3D细胞聚集在地球上。结果 模拟微重力培养中肝细胞24h内贴附微载体并出现三维结构,24~72h发展为*的肝细胞一微载体聚球体。电镜下可见细胞膜的3种不同形态,其分布与功能相一致。结论 模拟微重力培养方法能使肝细胞形成分化的三维类*结构,灌流式细胞培养RCCMAX,在*工程领域存在良好的应用前景______摘自《模拟微重力培养X肝细胞的形态特点》
三维细胞培养系统RCCS,又称为RWVB即转壁式生物反应器!
RWVB是由两个同心圆柱体构成的旋转装置。将细胞与培养液置入内、外圆柱体之间,整个装置绕纵轴旋转,根据细胞的种类、性质、数量、培养物的大小调节容器的旋转速度,使培养物长时间保持悬浮状态。二维细胞培养对我们对细胞生物学的理解做出了很大的贡献,但是能从中获取的信息量还是有限制性的。它是一种完全充满液体的生物反应器,以水平方向为轴作旋转运动,这种培养环境形成湍流较少,剪切力低,连续培养RCCMAX,物质传递*,并有丰富的供氧。国内外大量的实验结果表明,RCCMAX,采用RWVB可以模拟产生微重力条件下的生物效应,RCCMAX连续培养,可以作为模拟微重力生物效应的有效手段。
———摘录自“模拟微重力培养在骨和**工程中的应用”
目前,RCCS-3D三维细胞培养系统包括RCCS-D﹨RCCS-2D﹨RCCS-4D﹨RCCS-8D﹨RCCS-4DQ﹨RCCS-8DQ以及RCCS-H﹨RCCS-2H﹨RCCS-4H﹨RCCS-2HD﹨RCCS-4HD和*于*培养的RCCS-SC﹨RCCS-2SC﹨RCCS-4SC﹨RCCS-4SCQ以及高X端的连续灌注式(即培养液可以根据设定的补给速度连续不断地自动更新,尤其适用于长周期的培养)细胞培养系统RCMW﹨RCMW-DUAL等多种规格的系统!目前*工程的研究的方法日新月异,现在苏州乾芸仪器科技有限公司提供了源自美国的RCCS-3D三维旋转细胞培养系统,它是一种采用模拟微重力环境的转壁式RWVB生物反应器的三维细胞、*培养系统。
三维细胞培养RCCS-3D模拟微重力培养是一种全新的*培养技术?
模拟微重力培养是一种全新的*培养技术,其核心技术是建立动物细胞的三维培养体系,在近10年取得了快速发展。微重力反应器源自美国航空航天局,是一种水平旋转的、无泡的旋转培养仪,可以提供模拟微重力环境,具有充分的氧和营养物质的交换、三维立体结构、低剪切力和*的流体力学特征等优点。在这些条件下,在旋转壁血管内生长的细胞聚集在一起形成与3D*结构相当的3D多细胞结构或团块,如果不同的细胞类型一起培养,甚至更多(7)。这种悬浮培养技术为多种细胞和*块的生长和代谢提供良好的培养环境,可以进行高密度的*培养,并保持所培养细胞的*分化特异性。