广东瀛亨检测技术有限公司主要研发人员坚持秉承母校博学、笃行的理念,以严谨、求实的工作态度,不断挖掘*市场需求,服务京三角、长三角、全国乃至东南亚和北欧的客户。广东瀛亨检测技术有限公司研发团队在长期实验室分析经验的积累中,一直坚持专注于成分分析领域。公司主营:凝胶分子量检测,分子量检测机构,分子量检测服务中心,分子量检测中心,分子量检测公司等等。
普适校正原理
GPC分离实验预先需要作出待测试样的校正曲线,以分散程度为1的样品作为标样。经过阴离子聚合得到的聚苯乙烯分散程度接近1,可近似看作单分散样品,作为标样使用。但是,聚苯乙烯只是一个特例,其校正曲线并不能适用于所有的聚合物样品。
为了能推广,必须找到一个参数,通过该参数,可以适用于所有聚合物分子质量,该参数即为普适标定参数,利用该参数得到的校正曲线即为普适标定曲线。研究表明,聚合物流体力学体积可以作为普适标定参数。
分离原理
凝胶渗透色谱的分离过程利用体积排除效应,以装有凝胶颗粒的色谱柱为设备,凝胶颗粒事先经溶剂充分溶胀,并且凝胶内部存在网眼。将待测试样溶于溶剂中,加入色谱柱进行淋洗,其中,体积小的分子能够进入凝胶内部自由扩散,而体积大的分子则不能顺利进入凝胶内部,于是被排除在外。根据这一原理,可根据分子体积大小差异对样品进行分离。因此,大分子先被淋洗出来,体积较小的分子随后被排除。这样,根据淋洗时间和淋洗溶剂的体积,可推算出聚合物相对分子质量的大小,除此之外,还能得出分子量分散程度的关系。
广东瀛亨检测技术有限公司是*的第三方研发检测及技术服务机构,清远分子量检测,****从事配方分析,各类物质分析测试、未知物(成分)分析、配方剖析、工业诊断与技术开发服务的高新技术企业,公司成立初衷便是利用好的技术为广大企事业及个人提供****、有效的服务,因此公司核心技术成员均具备多年产学研经验的博士和*级高工,与此同时还引进了拥有丰富海外研发经验的海归研发人员,为国内企业提供前沿的研发信息和技术服务。公司主营:分子量检测机构,分子量检测服务中心,分子量检测中心,分子量检测公司,分子量检测多少钱等等。
蛋白质分子量测定——葡聚糖凝胶过滤法测定
*和器材
一、*
洗脱液:0.05M Tris-HCl缓冲液(pH7.5),0.1M KCl溶液:称取12.12g Tris,15g KCl,先用少量去离子水溶解,再加入6.67mL浓HCl,用去离子水定容至2L。
蓝色葡聚糖2000;Sephsdex G-100;N-乙酰酪氨酸乙酯饱和溶液(以洗脱液饱和)。
二、材料
牛血1清白蛋白(Mr 67 000);卵清蛋白(Mr 43 000);胰凝乳蛋白酶原(Mr 25 000);细胞色素c(M*800)。
三、仪器
层析柱;恒压洗脱瓶; 紫外检测仪或紫外分光光度计;自动分部收集器。
蛋白质分子量测定——葡聚糖凝胶过滤法测定
操作方法
一、溶胀凝胶
取Sephadex G-100 15g,加200mL蒸馏水,沸水浴中溶胀5小时。待溶胀平衡后,倾去上层清液,包括细颗粒,然后再放些蒸馏水搅乱,静置使凝胶下沉,再倾去上层清液,至无细颗粒为止。溶胀平衡和*洗净的凝胶经减压抽气除去气泡,即可准备装柱。
二、装柱
层析柱必须粗细均匀,聚合物分子量检测服务,柱管大小可根据*需要选择。一般柱直径(内径)为1cm,pc分子量测试, 如果样品量比较多,用直径2 ~ 3cm的柱。通常柱愈长,分离效果愈好,高分子分子量检测,但柱过长,实验时间长而且样品稀释度大,易扩散,反而分离效果不好。当用作脱盐时,柱高度为50cm比较合适;在进行分级分离时,100cm高度就够了。
装柱时,将柱垂直至于铁架上。在柱中加约1/3柱容积的洗脱液,并赶净滤板下方气泡,使支持滤板底部完全充满液体,然后将柱的出口关闭。把已经溶胀好的凝胶调成薄浆,倾入柱内,胶粒逐渐扩散下沉。当沉积的胶床至2~3cm高时,打开柱的出口,并注意控制操作压以均匀不变的流速直到胶装完为止。柱装好后,在床的上面盖上一张大小略小与柱内径的滤纸片,以****样品中一些不溶物质混入床中和加样时凝胶被冲起。再以洗脱液平衡柱层,直至层析的胶床高不变为止。柱装得是否均匀,可用蓝色葡聚糖上柱检验;如果色带均匀下移,说明柱子已装好,可以使用。
三、上样
称取0.5mg蓝色葡聚糖2000(分子量200万以上)四份,分别放在称量瓶中,再称取标准蛋白牛血1清白蛋白(Mr 67 000);卵清蛋白(Mr 43 000);胰凝乳蛋白酶原(Mr 25 000);细胞色素c(M*800)各10mg,分别放在各称量瓶中;各瓶加入N-乙酰酪氨酸乙酯饱和溶液0.5mL,使混合物溶解后分别上柱。
样品上柱是实验成败的关键之一,若样品稀释或上柱不均,会使区带扩散,影响层析效果。上样时应尽量保持床面的稳定。先打开柱的出口,待柱中洗脱液流至距床表面1~2mm时,关闭出口,用滴管将样品慢慢地加至柱床表面,打开出口并开始计算流出体积,当样品滲入床中接近床表面1mm时关闭出口,同加样品时一样小心地加入少量洗脱液,再打开柱的出口,使床表面的样品也全部滲入柱内。这时样品已加好,在床的表面再小心地加洗脱液,使高出床表面3~5cm。
四、收集和鉴定
层析开始,在柱的出口处以试管分管收集流出液,流速为0.4mL/min, 4mL/管,收集液在280nm处测OD值。高的一个OD值时的体积即为吸收峰的洗脱体积Ve。当N-乙酰酪氨酸乙酯洗脱峰出现后(此峰洗脱体积不必记录);按同样的方法进行第二个标准蛋白质样品的上柱,操作方法和步骤同前。
将各标准蛋白质测得的洗脱体积Ve对它们的分子量对数作图,则应获得*性的标准曲线。
广东瀛亨检测技术有限公司针对每个样品成立由不同领域技术人员组成的分析小组,逐样讨论、设计分析方案,由相关****经验丰富的高1级工程师担任总负责人,对其相应签发的检测报告永1久负责。公司会将客户反馈记录在档,并依此决定该工程师的技术级别及薪酬,技术服务中心通过这一模式,保证对每个检测报告的准确、神圣和严谨,珍视客户为分析与检测所花的每一分钱。未来,广东瀛亨检测技术有限公司将致力于帮助每一个脚踏实地、勤奋前行的客户,并以****的技术、问心无愧的服务,助力您成就未来! 公司主营:分子量检测多少钱,分子量检测哪家好,平均分子量检测,聚合物分子量检测,多糖分子量检测等等。
光散射法分子量测定技术及应用
概述:对高分子聚合物材料而言,分子量是一个基本的结构参数,它的许多性能与分子量有关,如*冲击、高弹性等性能就是分子量大的结果。但是,分子量太大也影响高分子材料的流变性和加工性,给加工成型造成困难。因此,兼顾到使用性能和加工性能两方面的要求,需要对高分子聚合物的分子量加以控制,需要研究聚合条件对产品分子量的影响,进而研究分子量对材料的加工性能和使用性能的影响,这两方面的工作都要求测定聚合物的分子量。
高分子聚合物的分子量一般在103-107之间,平均分子量有各种不同的统计方法,常用的有数均分子量、重均分子量、Z均分子量、粘均分子量等。分子量的测试也有多种方法,如端基分析法、膜渗透压法、光散射法、粘度法、凝胶色谱法等。不同方法得到的平均分子量的统计意义也不同,本文所介绍的是光散射法测定高分子聚合物的重均分子量。
分子量测定技术对样品中的污染物或灰尘十分敏感,因此需要严格环境条件保证,一是所有玻璃器皿必须严格地除尘,且没有划伤。二是要用高纯蒸馏水做介质,并且用一次性过滤器过滤。三是实验室要洁净,洁净度等级在十万级以上。四是要避光,阳光不能直射在仪器上,是在暗室里进行分子量测定。
分子量的测定方法并不复杂,首先要配制4个不同浓度的样品溶液,其次是依次将标准物质、溶剂及配置好的4个浓度溶液按照浓度由低到高的顺序放到仪器中,分别测定它们散射光强,经过Kc/R(θ)变换,Kc/R(θ)数据点直线拟合即可计算出分子量结果和第二维利系数。
电位法:
电位滴定是利用被测溶液离子浓度的改变,使浸在溶液中的指示电****电位发生变化。在滴定过程中,指示电****电位的突跃表示溶液等量点的到达。因此,对于颜色较深或混浊不能用指示剂来确定其终点,或者还没有适当指示剂的溶液,均可采用电位滴定法。在酸碱滴定中以玻璃电****为指示电****,测定溶液中PH值的变化。以PH值为纵座标,所消耗标准溶液的毫升数为横座标作图,在曲线的突跃点上找出等量点。但对于电位突跃不明显而难以找出等量点的溶液,如已知其等量点的理论PH值,则可用该PH值为滴定终点。
电导法:
电导滴定是利用被测体系导电能力的变化来测定溶液等量点。被测溶液和滴定用标准溶液都是电解质,因此,在滴定过程中随着溶液组成的改变,溶液的电导也随之改变。每滴入一部分标准溶液后,随即测定溶液的电导,由电导值的突变确定滴定终点。通常以测得的电导值对所耗用*的毫升数作图,根据曲线的显著转折点确定终点。