RCCS-8DQ细胞培养|微重力悬浮(在线咨询)|细胞培养

旋转式细胞培养系统(以下简称RCCS)生物反应器是如何工作的？

RCCS生物器是由中心的一个同轴氧合器以及一个水平旋转培养皿所构成的。当培养皿充满培养基并且旋转时，培养基像固体一样围着水平轴旋转。氧合器与容器壁以相同的角速度旋转。这些条件使得培养容器内产生层流和*****小的剪切力。细胞由离心力，RCCS-4DQ细胞培养，重力和科式力作用而成悬浮状态，因此在RCCS生物反应器的细胞受到*****的机械应力和高通量运输(营养物质，氧气等)因而能聚集形成类*聚合物。气体传输通过硅树脂氧合器传输，从而避免气泡的形成和湍流。

细胞培养常见问题：

1、可否使用与原先培养条件不同之培养基？

不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基， 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基， 细胞大都无法立即适应， 造成细胞无法存活。

2、可否使用与原先培养条件不同之血X清种类？

不能。血X清是细胞培养上一个****为重要的营养来源， 所以血X清的种类和品质对于细胞的生长会产生****大的影响。来自不同物种的血X清，细胞培养， 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血X清使用错误常会造成细胞无法存活。

随着细胞的不断增殖， 应调整转速以补偿沉降速率的增加。该没有*性的应力允许大尺寸聚集大的细胞块。正常的细胞，人类细胞， 贴壁依赖和悬浮细胞、肿X瘤细胞以及脆弱的单或共培养物通过传统的培养方法都已经实现了体外培养。而微重力旋转细胞培养系统RCCSTM作为新型的培养技术其主要优点之一是生长于其中的细胞分化或模拟结构的*培养物能够继承了双亲细胞的遗传物质。研究者可以用相同的细胞混合物接种培养物， 其通常在体内发生。这些细胞生长并*成三维*聚集体类似于母体*。这种增长是可能的，RCCS-D细胞培养， 因为*性的湍流和碰撞力在水平旋转细胞培养系统中是****X小的。手术外植体或活*检查可以转入RCCSTM培养系统以维持不坏死。这种低剪切力培养环境可以用于培养任何可在传统培养技术下培养的细胞。

细胞传代的一般方法？

开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和*是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH 培养液或MEM 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血X清、庆大*溶液（1 万单位）、7.5％NaHC03 溶液、0.25％胰蛋白酶、PBS 洗液。

用具：小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1）、细胞吹打管（20 ml）(以上用具需经121℃至

少15 分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、—20℃冰箱

操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好*、无异常及可X疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-0.2%LH 培养液100ml 内，加入灭活小牛血X清10m1，庆大*溶液0.3m1，7.5%碳酸氢钠溶液3ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS 洗液冲洗细胞表面1-2 次，每次10m1，弃去洗液，向细胞瓶内加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1 细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中，再加入10m1 细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于37±1℃孵箱培养。约2～4 天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。