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*切片_求精教学(认证商家)_*切片供应商

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显示标本结构成分的染色法

一*素伊红染色法(HE染色法)

为****常用的染色法。该法应用于各种*的染色,是*学技术的基本方法,对任何液体固定的*和各种包埋的切片均可使用,只是对不同包埋的切片法处理略有不同。下面简介石蜡包埋切片的HE染色法。

1、脱蜡:石蜡切片的*内部充满石蜡,不能使水溶性染液着色,因此在染色前必须首先用*将石蜡脱掉,共两次。

2、下行入水:将已脱蜡的标本浸入无水酒精及各级酒精,使*逐步接近水。3、蒸馏水略洗。

4、*素溶液染色约5—15分钟

5、自来水洗去多余染料。

6、入稀释的盐酸酒精溶液中分色,边分色边镜检,至核呈红紫色,细胞质无

色为合适。



下面从原理方面简要介绍几种常用的*化学染色技术:

1、显示琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的硝基-BT法:

(Succinate dehydrogenase)

⑴酶的*及生物学意义:

琥珀酸脱氢酶是线粒体标志酶,其存在于所有有氧呼吸的细胞,和线粒体内膜紧密结合。该酶不需辅酶而自身有黄素蛋白(FP,Fl*oprotein)为辅基。在组化反应中常用来反映三羧酸循环的情况。

⑵原理:上述的反应****后一步的原理是,硝基-BT(Nitro-blue tetrozolyum,四唑氮蓝)系异环族化合物四唑盐,当它接受氢时,本身被还原为有色沉淀产物(甲)(Formazan)。



固定液有多种,由一种化学物质组成者,称为单纯固定液;由多种化学物质组成者称为混合固定液。甲醛是****常用的一种单纯固定液,它对*的主要作用是使*硬化和防腐,对*的穿透力强,固定均匀,*收缩较少,能保持*细胞的固有形态,染色后颜色清晰。但甲醛放置日久后,可自行分解,产生甲酸,使溶液呈酸性,影响细胞核着色。因此,在备用的甲醛溶液中加入某些小剂量的中和剂,使溶液呈中性(或弱碱性),称其为中性甲醛。中性甲醛属于混合固定液。用中性甲醛固定*,更有利于保持*的*原性,有利于*****化学标记物的检测,并可避免甲醛色素的形成,但不能保存*内尿酸盐类结晶。乙醇也是一种单纯固定剂,有固定兼脱水的作用,但其渗透力较弱,固定速度较慢,易使*变脆,另外,乙醇能使核蛋白质沉淀,核蛋白质被沉淀后能溶于水,不利于染色体的固定,是核着色不良,影响形态学的观察,故乙醇一般不作常规固定液应用。

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