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病理切片、求精教学、病理教学切片

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浸蜡、包埋

(1)使石蜡浸入*中,取代*中含有的透明剂。

(2)包埋:将浸蜡后的*置于融化的固体石蜡中,石蜡凝固后,*即被包在其中,称蜡块,此过程称为包埋。

切片和贴片

(1)修整蜡块:可视其*的大小,在*边缘约0.1~0.2cm处,切去余蜡部分,否则易造成*皱缩不平。

(2)准备好切片用具:切片刀、毛笔、*镊子(弯)、*烘温控仪

(3)安装蜡块:将修好的蜡块安装在金属或木制持蜡器上。

(4)安装切片刀:将切片刀安装在切片机的刀台上,把刀台上的紧固螺丝旋紧,使切片时不产生振动,能保持一定的切片厚度。

(5)切片的厚度:切片机的厚度调节器上刻有0~50μm或0~25μm,可任意选择其厚度,石蜡切片的厚度一般在4~6μm。

(6)切片

(7)铺片:用*镊子镊起蜡带轻轻平铺在40~45℃的水面上,借水的张力和水的温度,将略皱的蜡带自然展平。

(8)贴片、烘片:待切片在恒温水面上充分展平后,将蜡片捞到载玻片的中段处倾去载玻片上的余水,置入60~65℃恒温箱内或切片*烘温控仪的烘箱内烤片15~30分钟,脱去溶化*间隙的石蜡。



固定是技术室工作的****步,也是在整个制片过程中无法补救的一步。所谓“固定”,就是*离体后,用各种办法使其细胞内的物质尽量接近其生活状态时的形态结构和位置的过程。固定的目的是为了*****细胞自溶与*,****了细胞内的酶对蛋白质的分解作用,使细胞内的各和成分如蛋白质、脂肪、碳水化合物或酶类转变为不溶性物质,以保持原有的结构与生活时相仿。另外,*固定后,均呈一定的硬化状态,增加*韧性,而且不易变形,有利于以后的*处理。所以*一旦离体必需及时固定,固定液的量应为*的5倍。固定的关键主要与固定的及时性、固定液的选择、固定液的浓度、固定的温度和时间有关。


浸蜡

*透明后,在熔化的石蜡内浸渍的过程称为浸蜡。用其他浸透剂(如火棉胶、明胶等)渗入*内部的过程可称为浸透或透入。浸蜡温度过高(超过60℃),在蜡内加入*蜡或由于透明时带进的*过多,都会导致*发硬,还会使*内的*原受到*;所以作者主张浸蜡用的石蜡熔点在56℃(三道),****道:石蜡30分钟;第二道:石蜡90分钟;第三道:石蜡,90分钟。浸蜡温度控制在56~58℃左右。(****道也可用硬脂酸石蜡1:3混合浸蜡,不仅可软化*,特别适用于比较韧、硬的*,而且由于硬脂酸是弱酸性的,对细胞核有媒染作用,核浆比鲜明,但容易脱片;同时对疏松*容易散片)。有条件的可以每*开****道石蜡的盖子,让*挥发。浸蜡所用的石蜡如有杂质尽可能过滤,以防附在*上,造成切片刀刀口受损,或切片*碎和划痕增多。


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