脱水透明
标本经过固定和冲洗后,*中含有较多的水分,必须将*块内的水分置换出来,这一过程叫做脱水。无论是用石蜡切片,还是用火棉胶切片,都必须除去*中所含水分,因含水*与石蜡、火棉胶等包埋材料不相容,常用的脱水剂为一系列不同浓度的乙醇。
脱水的步骤是:80%、90%、95%、100%各种浓度乙醇2小时,此过程可用脱水机自控完成。
*也是一种脱水能力很强的脱水剂,但因其脱水能力很强,对*有剧烈收缩作用,在制作科研、教学切片时一般不用该*。因乙醇、*等不溶于石蜡,还要经过一个能溶于石蜡的溶剂替代过程称为透明。常用的透明剂有*、****、水杨酸甲酯等。
病理切片的制作
1.取材
(1)材料新鲜:取材*愈新鲜愈好,**一般在离体后,动物*在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。
(2)*块的大小:所取*块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入*内部,但根据制片材料和目的不同,*块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其*块可以薄取0.1~0.2cm即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取0.3 ~0.5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3)勿挤压*块: 切取*块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。夹取*时切勿过紧,以免因挤压而使*、细胞变形。
固定
(1)小块*固定法:这是****常用的方法,从*或动物体取下的小块*,须立即置入液态固定剂中进行固定,通常,标本与固定液的比例为1:4~20,但*块不宜过大过厚,否则固定液不能迅速渗透。故取*块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。
(2)注射、灌注固定法:某些*块由于体积过大或固定液****难渗入内部,或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。这时宜采用注射固定或灌注固定法。将固定液注入血管,经血管分支到达整个*和全身,从而得到充分的固定。
(3)蒸汽固定法:比较小而厚的标本,可采用*或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片,则应在血片未干燥前采用*或甲醛蒸汽接触固定。
****常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。