水中微生物检测

1 基本原理：*总数是指水样在一定条件下培养后所得1ml水样所含菌落的总数。 总大肠菌群系指一群在37℃培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢*。该菌群主要来源于人畜粪便，具有指示菌的一般特征，故以此作为粪便污染指标评价饮水的卫生质量。水中总大肠菌群数系以100ml水样中污染的总大肠菌群****可能数（MPN）表示。  按*饮用水卫生标准规定，1毫升自来水中杂菌数不得超过100个，大肠菌群数1000毫升水中不得超过3个才算合格。
2 材料：营养琼脂、乳糖胆盐发酵培养基、酒精、棉签、培养皿、无菌广口瓶 
3 方法：
3.1 采样（自来水）：先将水*打开，放水1~2分钟后，关闭水*。用酒精*球灼烧*三分钟灭菌，再开放水*使水流5分钟，用无菌瓶收集水样。
3.2 *总数检查：
3.2.1 用灭菌吸管吸取1ml水样，注入灭菌培养皿*做2个。 
3.2.2 分别倾注约15ml已熔化冷却至45℃左右的营养琼脂，混匀后置37℃培养24小时进行菌落计数，同时应作一空白对照。两个培养皿的平均菌落数即为水样1ml中的*总数。
3.3 大肠菌群数检查：乳糖发酵试验→分离培养→证实试验→报告
3.3.1 乳糖发酵试验：自来水的接种方法：在2个装有50ml三倍料乳糖胆盐发酵液的三角瓶中，各加入100ml水样；在10支装有5ml同样发酵的试管中，各加入10ml水样，混匀。将上述各发酵管（瓶）置36±1℃温箱内，培养24±2小时，观察结果。如所有发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性；如有产气者，则按下列程序进行。 
3.3.2 分离培养：将产气的发酵管用接种环分别以划线法转接于伊红美兰琼脂平板上，置36±1℃温箱内，培养18~24小时，取出观察菌落形态。  
3.3.3 证实试验：在每个平板上，挑取*菌落(紫黑色或淡紫红色，有或略有或没有金属光泽的菌落)1~2个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，置36±1℃培养24±2小时进行*酵试验，观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的芽孢*即可报告为大肠菌群阳性。
4 报告：每毫升自来水所含菌落数以个/mL表示；根据证实为大肠菌群阳性的管数，查大肠菌群检索表，报告每升水样的大肠菌群的****可能数。
注：本文参照GB5750-85《生活饮用水标准检验方法》